关键词：特染; 弹力纤维; 优化; 体会;

　　弹力纤维染色技术对于辅助诊断, 特别是对肺癌临床分期具有重要意义, 因此在日常病理诊断中, 弹力纤维染色尤为重要。弹力纤维较坚固, 弹性大, 容易伸展, 在结缔组织中起弹性作用。弹力纤维分布广泛, 特别是皮肤、血管壁、韧带、气管、肺泡等。在常规HE染色中弹力纤维难与其他纤维区别, 只有用特殊染色的方法才能清晰的显示。总结日常工作对弹力纤维染色法进行优化后比较, 做出以下体会。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料收集日常外检标本104例, 其中肺组织78例、肠组织19例、胃组织5例、胸膜组织1例、脑组织1例。

　　1.2 试剂益利化学品公司Verhoeff铁苏木精试剂盒、自配维多利亚蓝染液、马休黄、核固红、醛复红等。

　　1.3 方法

　　1.3.1 Verhoeff铁苏木精染色法[1]

　　1.3.2 VBM染色法[1]组织切片脱蜡至水;

　　切片入70%乙醇中洗2 min;将切片浸入Victoria blue染色中2 h;用95%乙醇分化1 min;浸入蒸馏水中洗3次;用马休黄染色液染1 min;快速无水乙醇冲洗2次;二甲苯透明, 中性树胶封固。优化后步骤:将马休黄改为核固红, 滴染3~5 min。

　　1.3.3 Gomori醛复红染色法[1]

　　2 结果

　　Verhoeff铁苏木精染色法:弹力纤维呈黑色或黑褐色弯曲线状, 细胞核呈黑色, 胶原纤维呈红色 (图1) 。Gomori醛复红染色法:弹力纤维呈清晰紫色弯曲的线状 (图2) 。VBM染色法:弹力纤维为蓝色或蓝绿色清晰弯曲线状, 背景为淡黄色 (图3) , 经改良步骤后染色:弹力纤维呈蓝色或蓝绿色弯曲线状, 细胞核呈红色 (图4) 。

　　图1 Verhoeff铁苏木精染色法图2 Gomori醛复红染色法图3 VBM染色法图4 VBM染色法加核固红复染图1~4均为肺组织

　　3 讨论

　　Verhoeff铁苏木精染色法, 操作简单, 灵敏度低, 针对性不强。由于肺组织内碳末沉积, 自身颜色较深, 造成一定的视觉干扰, 分化程度难以掌握。应在镜下控制分化。

　　Gomori醛复红染色法相对简单易行, 不存在分化过度的现象, 弹力纤维也更加匀细清晰。采用滴染的方式, 背景干净。该方法无细胞核染色, 需借助HE切片进行对比观察。

　　VBM染色法, 较前两种方法, 步骤相对减少, 颜色清新, 镜下观察舒适, 但也存在自身的缺陷, 滴染易产生沉渣, 需采用浸染的方式排除干扰。马休黄复染不能进行核的观察, 需要借助HE切片进行对比, 为弥补这一不足, 我们优化了染色方法。将马休黄复染改为核固红, 增加了核的信号, 避免了颜色重叠, 为明确诊断增加了信息量。

　　综上所述, 弹力纤维染色在特染中应用广泛, 实际工作中影响因素较多。可根据诊断需要适当的改良染色方法。改良后的染色方法经外检反复验证, 性质稳定, 值得在今后的临检工作中推广使用。为保证染色性质稳定, 还需规范化操作, 做好质控。

　　参考文献

　　[1]龚志锦, 詹镕洲.病理组织制片和染色技术[M].上海:上海科学技术出版社, 1994.82-88.

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