摘要

　　本文对筛选于牛、羊瘤胃源的6种益生菌（解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70等益生菌，均为本实验室保存。）进行生理特性的测定，通过平板划线的方法测定这6种菌的相互拮抗试验；测定6种菌的耐热、耐酸和耐胆盐特性；以确定6种菌是否具有成为微生态制剂菌源的潜力。在此基础上，将6种益生菌在其相应的培养基上进行活化培养和扩大培养，得到相应灌胃液并灌胃小鼠。通过观察各组对小鼠生产性能、肠道菌群、脂肪积累量、免疫指数和血糖调节等指标，从6种益生菌中筛选对小鼠影响最佳的有益菌。将上述实验筛选出的4种最优益生菌（解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、乳酸杆菌Lw-R35、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70）进行固定化。本实验所用载体为实验室制备的多孔淀粉，进行固定化实验，并对固定化制剂进行电镜形态观察和载量测定。最后，在一定时间段对活菌个数进行测定，得出保藏时间对微生态制剂的影响。本研究的主要成果如下：

　　（1）显微镜下观察6种菌的菌落形态，发现菌体之间差异较大，容易区分；拮抗实验表明，6种菌之间没有明显的拮抗作用；对6种菌进行了生长曲线测定。

　　（2）分别通过耐热性实验、耐酸性实验和耐胆盐实验，分别检验了解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70的耐受性。结果表明，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16和产纤维素酶菌Lw-X21表现出较好的耐热性，可以经受生产过程中的高温；而乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48和酵母菌Lw-JM70耐热性比较差，不适合在高温条件生产，通常采用冷冻干燥等生产方法。在耐酸性方面，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70表现出很强的耐酸性，枯草芽孢杆菌Lw-K16在pH为2保存4h后存活率仅为26.30%,在pH为3.0时表现出较强的耐酸性。在耐胆盐实验中发现产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70可以在胆盐浓度为0.3%的环境下增殖，同时，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16和产蛋白酶菌Lw-D48也表现出一定的胆盐耐受性。乳酸菌Lw-R35的胆盐耐受性最差，在0.3%胆盐浓度条件下处理12h后的含量仅为53.7%.

　　（3）6种益生菌的灌胃喂养，均能够不同程度地提高小鼠体重增加量，促进小鼠对鼠粮的利用率，同时还能减少体内脂肪的沉积，而且对肝脏不存在毒副作用。在小鼠免疫指数影响的实验中发现，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21和产纤维素酶菌Lw-X21的喂养对小鼠脾脏指数和胸腺指数均有极显着提升作用（P<0.01）。乳酸菌Lw-R35和产纤维素酶菌Lw-X21喂养可以使小鼠肠道有益菌株的数量显着增加（P<0.05），改善小鼠肠道环境，维持肠道内环境的平衡。空腹12h后对益生菌喂养的小鼠灌喂葡萄糖溶液，比较后发现，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21喂养组小鼠和产蛋白酶菌Lw-D48喂养组小鼠对其体内血糖调节能力显着提高（P<0.05）。

　　（4）将上述实验筛选出最优的4种益生菌进行固定化。通过电镜观察发现益生菌无规则分布于载体表面，其中，酵母菌Lw-JM70的载量最小，约为3.81×108CUF/g.室温保藏7周后各组菌的存活率分别为解淀粉芽孢杆菌Lw-J2145.22%、乳酸菌Lw-R3553.85%、产纤维素酶菌Lw-X2157.63%和酵母菌Lw-JM7048.41%,说明通过对微生物的固定化，可以使微生物活性得到保持或延长。

　　关键词：微生态制剂，生产性能，肠道菌群，免疫指数，血糖值

Abstract

　　In this paper, the six probitics（Bacillus subtilis Lw-K16, Bacillus amyloliquefaciensLw-J21, Auto chthonous flora Lw-R35, Bifidobacterium Lw-D48, Bacillus Subtilis Lw-X21, and Saccharomyces Lw-JM70）screened from ruminal sources of cattle and sheep were determined by streak plate method. The physiological characterizations of heat tolerance, acid resistant and bile salt tolerance of these probitics were evaluated, to determine whether the six probitics have the potential to become the sources of microecologics. And then, the six probitics were activated and cultured. The gastric irrigation was prepared and used to feed mice. The indicators involving mouse production performance, intestinal flora, fat accumulation, immune index, and blood glucose regulation were investigated and four optimal probitics （Auto chthonous flora Lw-R35, Bifidobacterium Lw-D48, Bacillus SubtilisLw-X21, and Saccharomyces Lw-JM70） were screened from the six probitics in this paper. The four optimal probitics were immobilized using starch as a carrier and observed with electron microscopy as well as load measurement. The number of viable cells was measured over a certain period of time, and the result showed what the effect of the preservation time on the probiotics.

　　The main conclusions were described as follows.

　　（1） The colony morphology of six probitics was observed with microscope. It can be seen that there are large differences among them, and it is easy to distinguish. The antagonistic experiments showed that the antagonistic effect not obvious. Moreover, the growth curves of the 6 bacteria were described.

　　（2） With determination of physiological characterizations, it can be found that Bacillussubtilis Lw-K16,Bacillus amyloliquefaciens Lw-J21 and Bacillus Subtilis Lw-X21 exhibited good heat tolerance, while Auto chthonous flora Lw-R35, Bifidobacterium Lw-D48 and Saccharomyces Lw-JM70 were poor. Therefore, consideing this point, the processing method such as freeze drying could be use. About acid resistance, Bacillus amyloliquefaciensLw-J21, Auto chthonous flora Lw-R35, Bifidobacterium Lw-D48, Bacillus Subtilis Lw-X21,and Saccharomyces Lw-JM70 exhibited strong acid resistance. The survival rate of Bacillussubtilis Lw-K16 was only 26.30% after 4 h of storage at the value of pH is 2.0. At pH of 3.0, it showed strong acid resistance. Bacillus Subtilis Lw-X21, and Saccharomyces Lw-JM70 were found to proliferate in a bile salt concentration of 0.3%. At the same time, Bacillussubtilis Lw-K16, Bacillus amyloliquefaciens Lw-J21, and Bifidobacterium Lw-D48 also showed some bile salt tolerance. The bile salt tolerance of Auto chthonous flora Lw-R35 was the worst in these six probiotics, and the content was only 53.7% after treatment for 12 h under the condition of 0.3% bile salt concentration.

　　（3） All of the six probiotics can increase the weight of mice in different degrees, promote the utilization rate of mouse food for mice, and reduce the deposition of body fat. Moreover, there is no toxic side effect on the liver. With the experiment of the effect of mouse immune index, it was found that the effects of Bacillus amyloliquefaciens Lw-J21 and BacillusSubtilis Lw-X21 on the spleen index and thymus index of mice were extremely significant （P <0.01）。 Auto chthonous flora Lw-R35 and Bacillus Subtilis Lw-X21 could significantly increase the number of intestinal beneficial strains in mice （P <0.05）， improve the intestinal environment of mice, and maintain the balance of intestinal environment. After 12 hours of fasting, the mice fed with the probiotics were given glucose solution, and it was found that the mice fed with Bacillus amyloliquefaciens Lw-J21 had significantly higher blood glucose regulation （P <0.05） comparied with Bifidobacterium Lw-D48.

　　（4） The four optimal probiotics were immobilized. With electron microscopy, it reveals that the probiotics were irregularly distributed on the surface of the carrier. Among them, Saccharomyces Lw-JM70 load was the smallest, which was approximately 3.81×108 CUF/g. After 7 weeks storage at room temperature, the viability of each group of bacteria was45.22% forBacillus amyloliquefaciens Lw-J21, 53.85% for Auto chthonous flora Lw-R35, 57.63% for Bacillus Subtilis Lw-X21, and 48.41% for Saccharomyces Lw-JM70, indicating that the immobilization can effectively prolong or maintain the activity of microorganisms.

　　Key words:microecologics, production performance, intestinal microbiota, immune index, blood glucose

目 录

　　第一章绪论

　　1.1动物肠道内生菌

　　动物肠道菌群是一个多样性的动态平衡系统，是目前发现众多的生态系统中微生物菌群较多的系统之一[1].动物肠道菌达到平衡时大约生存着500种菌群，肠道菌群中以专性厌氧菌和兼性厌氧菌为主要的优势菌群，专性厌氧菌在肠道菌群中所占比例最多，据有关报道显示为99%以上，其中肠道细菌中类杆菌和双歧杆菌所占比例较高[2].动物肠道原菌群主要来自母体，在肠道内有着特定的繁衍顺序，研究发现菌落是按照需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌等顺序形成。刚出生动物肠道菌群相对较少，具体表现在种类稀少和生长缓慢等特征，动物从母体获得原菌群，慢慢形成初始的肠道菌系，伴随着后天生活环境中菌种的相继进入，在肠道内形成一个动态平衡的微生态系统[3].繁衍后的菌群生活在3个不同的微生态环境中，3个不同的微生态环境分别是腔道内、肠道表皮细胞表面和肠黏膜隐窝内[4].其中生长在肠道表皮细胞和肠黏膜的菌群大多数是来自母体的菌株，内层主要生存的是厌氧性菌株，中层菌株多为类杆菌，外层多为大肠杆菌、肠球菌等菌株，它们均与动物的肠黏膜免疫细胞有着紧密的联系。张社民等[5]从猪的胃、十二指肠、小肠、空肠和结肠中筛选得到5株菌，研究发现，5株菌遗传性能稳定，安全无毒，能够耐酸和胆盐的环境，是很好的猪用新型乳酸菌微生态制剂菌种。因此动物肠道部分内生菌可以应用到微生态制剂中。

　　1.2畜牧业发展现状与趋势解析

　　1.2.1畜牧业概念界定

　　1.2.1.1畜牧业的概念

　　生产动物性产品的产业，是指将猪、牛、羊等动物进行驯化饲养、繁殖利用其生产机理，将植物性产品转化为肉蛋奶等动物性产品的基础产业。畜牧业是现阶段人类跟自然界进行物质交换的不可缺少的桥梁，与种植业共同成为我国现代农业发展中的两大基础产业[6].畜牧业和种植业相互依托、相互促进，是现代农业生产的重要构成部分，为提高农业生产，开发利用生物资源方面起到重要作用。畜牧业的发展有效改善了消费者的食物结构，提高了人民的生活质量。畜牧产品的供给水平反映了一个国家居民消费水平的高低，体现了居民营养质量的好坏，同时也是检测农业发展在一个国家的重视程度[7].

　　1.2.1.2畜牧业产业

　　化畜牧业产业化是按照国内外市场需求为向导，通过市场引导龙头，龙头带动中等产业，中等产业连接农户的方式，围绕当地的养殖业开发生产主导产品。逐渐形成畜牧业产、供、销一体化经营。畜牧业的产业化经营能够更加合理的利用资源，更好的协调当前畜牧业内部之间的矛盾。一体化经营能够更容易的引进先进的科学技术和研究成果，保护生态环境，才能在发展中克服不合理的因素，使其向高产优质方向发展。通过建立完善的经营体制，才能使畜牧业持续健康发展。

　　1.2.2现阶段国内畜牧业发展概况

　　伴随着我国经济持续稳定的发展，多种多样的生产企业越来越多，我国首个饲料厂创建在深圳，到现在经历了40年的发展，它的建立具有深远的发展意义，标志我国畜牧业的发展历程。展现出我国畜牧行业的潜在生机。目前它已经成为我国畜牧行业发展的领头者，也在此过程中培养了许多优秀的畜牧工作者。

　　这40年的发展历程，是我国经济发展和经济制度转型的重要阶段，奠定了我国现在农业经济繁荣的基础。由最初的小农经济向散户养殖模式的转变也是畜牧业发展的趋势，其中有一些散户养殖企业已经开始向标准化生产和规模化经营发展。目前我国畜牧养殖业是以个体养殖散户为主体，在实际的生产环节中属于最底层的生产者，也是农业的生产中的劣势群体。现代畜牧业的发展，从长远角度分析，目前的发展趋势会制约整个行业的后续发展，产生上的恶性竞争以及产量的不确定状态，使得畜牧产业市场价格频繁的波动。我国是农业大国，主要产业为小农经营[8],经营理念相对落后，养殖效率还比较低下，整体的产值增加缓慢。我国畜牧业整体发展不均衡，基层构造不合理，地域性的防疫措施相对较弱，畜牧业的发展受到很大程度的阻碍。多数养殖户只重视短期效益的获取，在经营中容易出现跟风现象，容易造成内部竞争，导致养殖成本持续增加，养殖密度变大致使养殖区域非常靠近，有部分养殖户为了获得高额利润，不顾疫情的发生，可能会对现有的畜牧业发展造成一定得破坏。

　　1.2.3未来我国畜牧业的发展趋向

　　畜牧业作为农业发展的重要组成部分，在我国农业生成中发挥着重要的作用，更是衡量国家农业实力一个重要指标[9].日常生活中离不开衣食住行的推动作用，也就是在这个环节中需要把握发展的关键点。我国既是农业大国，也是世界上人口最多的国家，解决现有粮食问题，满足人们切实的粮食需求，是现阶段国家发展的重要考量层面，有着方法论的指导意义。在我国畜牧业是农业的重要分支，畜牧业的发展和运行是有着自身特定的规律，不仅可以给大家带来更多的口福，同时也能够提供更加丰富且美味的健康食品。综上所示；目前在我国深入发展畜牧业是非常必要的事情。也是未来畜牧业发展的必然趋向。所以在这个过程中要注重安全生产。抓住发展机遇。迎接发展挑战。强化相关企业的发展责任。现在我国畜牧业体现出规模化发展的特点和趋势，养殖散户逐渐变少，同时在这个环节中原有的大型实力企业在不断延拓，其中最为典型的代表就是养猪产业，中等规模及以上的养殖单位的数量在不断增加，这是符合市场发展的规律以及在发展之中的企业战略调整。现阶段中等以及以上的企业或者专业户的产生和迅猛发展，犹如雨后春笋般滋生，其生产发展更加专业化、正规化。这有利于企业的生产加工销售，显着的提升企业的运作效率，也是未来我国相关产业发展的重要延拓和发展趋。

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　　1.3 微生态制剂
　　1.3.1 微生态制剂的定义
　　1.3.2 微生态制剂的菌种
　　1.3.3 微生态制剂的作用机理

　　1.3.4 微生态制剂主要菌种在养殖业中的应用
　　1.3.4.1 枯草芽孢杆菌
　　1.3.4.2 乳酸菌
　　1.3.4.3 酵母菌

　　1.3.5 立题依据
　　1.3.6 研究内容
　　1.3.7 技术路线

　　第二章 六种益生菌培养特性研究
　　2.1 实验材料
　　2.1.1 材料
　　2.1.2 培养基
　　2.1.3 主要试剂与药品
　　2.1.4 实验仪器与设备
　　2.1.5 辅助器材

　　2.2 实验方法
　　2.2.1 六种菌菌落形态和染色观察
　　2.2.2 六种菌相互拮抗试验
　　2.2.3 六种菌生长曲线测定
　　2.2.4 六种菌的耐受性试验
　　2.2.4.1 六种菌的耐热性试验VI
　　2.2.4.2 六种菌的耐酸性试验
　　2.2.4.3 六种菌的耐胆盐试验

　　2.3 实验结果
　　2.3.1 六种菌的落形态和染色镜检
　　2.3.2 六种菌的相互拮抗作用
　　2.3.3 六种菌的生长曲线测定
　　2.3.4 六种菌的耐受性试验
　　2.3.4.1 六种菌的耐热性试验
　　2.3.4.2 六种菌的耐酸性试验
　　2.3.5.3 六种菌的耐胆盐试验
　　2.4 讨论
　　2.5 本章小结

　　第三章 益生菌在小鼠饲养中的应用
　　3.1 实验材料
　　3.1.1 材料
　　3.1.2 灌胃液的制备
　　3.1.3 小鼠的分组与饲养管理
　　3.1.4 仪器设备

　　3.2 实验方法
　　3.2.1 益生菌的喂养对小鼠体重的影响
　　3.2.2 小鼠对鼠粮的利用率
　　3.2.3 益生菌的喂养对小鼠肠道菌群的影响

　　3.2.4 小鼠粪便中四种主要营养物质的残留量
　　3.2.4.1 小鼠粪便中粗蛋白的测定
　　3.2.4.2 小鼠粪便中粗脂肪的测定
　　3.2.4.3 小鼠粪便中粗纤维的测定
　　3.2.4.4 小鼠粪便中粗灰分的测定

　　3.2.5 益生菌的喂养对小鼠肝脏指数和脂肪指数的影响
　　3.2.6 益生菌的喂养对小鼠免疫系统的影响
　　3.2.7 益生菌的喂养对小鼠血糖的调

　　3.3 实验结果
　　3.3.1 益生菌的喂养对小鼠体重的影响
　　3.3.2 小鼠对鼠粮的利用率
　　3.3.3 益生菌的喂养对小鼠肠道菌群的影响
　　3.3.4 小鼠粪便中四种主要营养物质的残留量

　　3.3.5 益生菌的喂养对小鼠肝脏指数和脂肪指数的影响
　　3.3.6 益生菌的喂养对小鼠免疫系统的影响
　　3.3.7 益生菌的喂养对小鼠血糖的调节作用
　　3.4 讨论
　　3.5 本章小结

　　第四章 用固定化技术制备微生态制剂
　　4.1 实验材料
　　4.1.1 材料
　　4.1.2 发酵培养液
　　4.1.3 主要试剂
　　4.1.4 仪器设备

　　4.2 实验方法
　　4.2.1 实验菌株的大量制备
　　4.2.2 固定化载体的选择
　　4.2.3 微生物固定化方法

　　4.3 实验结果
　　4.3.1 微生态制剂形态的观察
　　4.3.2 微生态制剂固定化的载量测定
　　4.3.3 保藏时间对微生态制剂的影响
　　4.4 讨论
　　4.5 本章小结

第五章结论

　　5.1六种益生菌培养特性研究

　　对解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM706种微生态制剂候选菌种进行了耐受性试验。

　　（1）耐热性试验结果显示，随着温度的升高，培养基中菌含量逐渐下降，在60℃培养1小时后，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM706种的存活率分别为10.68%、50.85%、5.85%、9.31%、4.28%、和5.83%,当温度到达70℃时，乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48和酵母菌Lw-JM70几乎不能存活，表明乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48和酵母菌Lw-JM70对高温的耐受性较差，在微生态制剂工业化生产中要避免长时间高温。

　　（2）耐酸性试验结果显示，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM706种菌随着培养时间的增加和pH降低，菌含量减少；在pH为2,培养4h后，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM706种菌的存活率为26.30%、56.23%、72.44%、79.43%、69.18%、61.65%.结果显示，除枯草芽孢杆菌Lw-K16外其他5种菌均对酸都有一定的耐受性。

　　（3）耐胆盐实验结果显示，产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70表现出良好胆盐耐受性，在胆盐浓度为0.3%的环境下可以增殖生长。在0.3%胆盐浓度下，培养12h后，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35和产蛋白酶菌Lw-D48的存活率分别为79.43%、87.09%、53.70%、69.69%.这些结果显示，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70均具有一定的耐受性，具备微生态制剂菌种的基本要求。

　　5.2益生菌

　　在小鼠饲养中的应用将解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、枯草芽孢杆菌Lw-K16、乳酸菌Lw-R35、产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM706种益生菌，制备一定浓度的灌胃液，对实验小鼠进行灌胃喂养，结果显示：

　　（1）6种益生菌喂养期间实验组小鼠鼠均健康存活，与对照组相比体重显着增加，喂养到第七周结束，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、产蛋白酶菌Lw-D48和产纤维素酶菌Lw-X21喂养组小鼠的体重明显大于对照组。

　　（2）提高了小鼠对鼠粮的利用率，实验组小鼠对鼠粮的料重比有着不同程度地提高，在灌胃喂养第三周产产蛋白酶菌Lw-D48、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM70组小鼠的料重比显着降低（P<0.05）。

　　（3）适当增加小鼠肠道中总厌氧菌的所占的比例，可以改善机体肠道菌群，能更好的维持肠道菌群的动态平衡，乳酸菌Lw-R35和产纤维素酶菌Lw-X21喂养可以使小鼠肠道有益菌株的数量显着增加（P<0.05）。

　　（4）促进了小鼠对鼠粮营养成份的消化和吸收。乳酸菌Lw-R35和产蛋白酶菌Lw-D48的喂养的小鼠对鼠粮4种主要营养物质的分解吸收显着增加（P<0.05）。

　　（5）小鼠脏器系数与对照组比较无显着差异，未见任何毒性反应，并且解淀粉芽孢杆菌Lw-J21和产纤维素酶菌Lw-X2的对小鼠体内脂肪组织积累控制显着（P<0.05）。

　　（6）增加了小鼠的免疫器官指数，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21和产纤维素酶菌Lw-X21的喂养对小鼠脾脏指数和胸腺指数提升影响均极其显着（P<0.01），进而增强小鼠免疫能力。

　　（7）提高了小鼠对异常的高浓度血糖调节作用，解淀粉芽孢杆菌Lw-J21喂养组小鼠和产蛋白酶菌Lw-D48喂养组小鼠对其体内血糖调节能力显着提高（P<0.05），进而增强了小鼠维持机体内血糖动态平衡的能力。

　　5.3用固定化技术

　　制备微生态制剂对解淀粉芽孢杆菌Lw-J21、乳酸菌Lw-R35、产纤维素酶菌Lw-X21和酵母菌Lw-JM704种益生菌进行微生物的固定化实验，并对固定化后的微生态制剂进行相关的研究。

　　（1）通过电镜观察发现菌体无规则的分布于多孔淀粉表面，也有部分菌体进入到载体的空隙中。利用载体和微生物之间的吸附力，将菌体牢牢的固定在多孔淀粉表面。

　　（2）通过对固定化制剂载量的测定，发现同一种载体，对不同菌株的吸附力也不同，乳酸菌Lw-R35的载量最大为6.28×108CUF/g,解淀粉芽孢杆菌Lw-J21次之为5.62×108CUF/g、产纤维素酶菌Lw-X21为5.42×108CUF/g;由于酵母菌Lw-JM70的菌体较大，固定相对较难，固定化制剂的含菌量相对较少为3.81×108CUF/g.

　　（3）保藏时间对微生态制剂的影响，随着时间的延长，固定化制剂的活菌数均不同程度的降低，第一周各组的菌体存活率均大于80%,到第七周产纤维素酶菌Lw-X21的存活率最高为57.63%,其他各组存活率分别为解淀粉芽孢杆菌Lw-J21为45.22%、乳酸菌Lw-R35为53.85%、酵母菌Lw-JM70为48.41%.说明该固定化能有效延长或保持微生物的活性。

　　参考文献
　　致 谢

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